omega胎牛血清是一種在生物科學(xué)研究和生物技術(shù)應(yīng)用中廣泛使用的培養(yǎng)基補(bǔ)充劑,具有重要價(jià)值。通常取自剖腹產(chǎn)的胎牛,通過(guò)心臟穿刺的方式采集血液,經(jīng)自然層析、離心、過(guò)濾等處理后得到。其外觀為淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物的稍黏稠液體。
胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛,適用于多種細(xì)胞系的培養(yǎng),包括干細(xì)胞系、腫瘤細(xì)胞株等。不過(guò),不同等級(jí)的胎牛血清在質(zhì)量和適用性上存在差異。特級(jí)類胎牛血清過(guò)濾工藝嚴(yán)格,內(nèi)毒素和血紅蛋白含量低,適用于難養(yǎng)和敏感細(xì)胞的培養(yǎng);優(yōu)等類胎牛血清性價(jià)比高,適用于多種細(xì)胞培養(yǎng);普通進(jìn)口胎牛血清則適用于對(duì)生長(zhǎng)條件要求不高的細(xì)胞株培養(yǎng)。
1、添加比例
常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)中,血清添加比例通常為5%~20%(基礎(chǔ)培養(yǎng)基體積),具體根據(jù)細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整。例如:
干細(xì)胞/原代細(xì)胞:可能需要更高比例(10%~20%)。
腫瘤細(xì)胞系:可低至5%~10%。
2、熱滅活(可選)
一般無(wú)需滅活:市售FBS已經(jīng)過(guò)嚴(yán)格檢測(cè),熱滅活(56℃、30分鐘)可能破壞生長(zhǎng)因子和活性成分,增加沉淀風(fēng)險(xiǎn)。
特殊需求時(shí):若用于免疫相關(guān)實(shí)驗(yàn)(如避免補(bǔ)體干擾),可在無(wú)菌條件下進(jìn)行滅活,但需充分搖晃并冷卻后使用。
3、混合均勻
將血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基后,需充分混勻(避免局部濃度過(guò)高或過(guò)低),建議使用滅菌的磁力攪拌器或反復(fù)顛倒容器。